膠質母細胞瘤(glioblastoma muhiforme，GBM)
是成人中樞神經繫統最常見最致命的原發性惡性腫瘤
，常用治療方法為手術治療、放療和化療。但即使是
聯合應用手術治療與放化療．患者的預後仍然較差，
確診後的中位生存時間隻有14個月。如何提高GBM治
療效果是神經外科臨床和基礎研究迫切需要解決的難
題。目前的觀點認為，GBM治療效果的提高，依賴於
對其發生發展過程中分子機制的進一步了解。
GBM的異常增殖是GBM的一個重要特征，抑制GBM
細胞增殖可以提高患者的生存率，但目前還不清楚
GBM細胞異常增殖的分子機制。劉寶輝編著的《RND3
在人腦膠質母細胞瘤中的作用及機制研究》前期通過
基因芯片方法檢測了大量基因在人腦GBM組織與正常
腦組織中的表達量．發現G蛋白RND3基因表達水平在
人腦GBM組織中遠遠低於其在正常腦組織中，體外細
胞水平實驗研究表明穩定高表達外源性RND3可以明顯
抑制GBM細胞的增殖。在此基礎上進行的小鼠腦內種
植GBM細胞的實驗結果進一步顯示高表達RND3可以明
顯抑制GBM腫瘤的生長。這些實驗結果均提示：RND3
通過抑制GBM細胞的增殖從而抑制腫瘤生長。
RND3作為小G蛋白GTP水解酶(small GTPase)家
族中的一員，可以調節部分腫瘤細胞的增殖，但具體
機制尚不清楚。前期實驗結果提示RND3基因的表達水
平與Notchl信號的強弱緊密相關，敲除小鼠顱內RND3
基因可以激活Notchl信號通路。GBM細胞繫U251細胞
中RND3可以通過結合Notchl受體的活性形式一Notchl
受體的膜內段一NICD，影響並降低細胞核內的NICD的
表達水平。這些結果提示RND3可能通過調節細胞核內
NICD的表達水平來調節Notchl信號，Notchl信號通路
是調節GBM細胞增殖的關鍵信號通路，但到目前為止
，Notchl信號調控細胞增殖的分子機制仍不清晰。如
何準確、有效而又合理地控制Notchl信號仍然是GBM
臨床治療中的巨大挑戰。基於這些困難，本書在前期
研究的基礎上提出了RND3通過調節Notchl信號通路進
而調節GBM細胞增殖的假說。為了驗證這一假說，本
書分為四部分進行研究：①RND3在GBM內的表達及與
患者術後生存時間的關繫：②RND3在GBM細胞增殖中
的作用：③RND3調節GBM細胞增殖的機制；④RND3調
節Notchl信號通路的分子機制。

引言
第1章 材料與方法
1.1 免疫組織化學染色
1.2 免疫熒光雙染
1.3 免疫印跡技術
1.4 熒光定量PCR技術
1.5 生存時間及腫瘤大小
1.6 細胞培養
1.7 細胞轉染
1.8 質粒體的擴增與提取
1.9 穩定細胞繫的建立
1.10 BrdU
1.11 立體定向種植腦腫瘤
1.12 RND3基因敲除小鼠的構建與飼養
1.13 基因芯片技術
1.14 雙熒光素酶報告分析繫統
1.15 逆轉實驗
1.16 免疫沉澱
1.17 定量ChIPs
1.18 MGl32實驗
1.19 laz staing
1.20 統計學方法
第2章 實驗結果
2.1 RND3在GBM中的表達量及其與患者預後的關繫
2.2 RND3在GBM細胞增殖中的作用
2.3 RND3調節GBM細胞增殖的機制
2.4 RND3調節Notchl信號通路的分子機制
第3章 討論
3.1 RND3在GBM組織中異常性低表達並在GBM發生發展中有重要作用
3.2 RND3可以抑制GBM細胞的增殖
3.3 RND3調控GBM細胞增殖的機制是調控Notchl信號通路
第4章 綜述：RND蛋白的作用和調節
4.1 結構和表達
4.2 RND蛋白在肌動蛋白細胞骨架中的作用
4.3 RND蛋白的靶點
4.4 RND蛋白靶蛋白的演變
4.5 RND蛋白的調控
4.6 RND3磷酸化
4.7 泛素／蛋白酶體途徑降解
4.8 RND3蛋白在腫瘤中的表達與作用
4.9 結論和展望
參考文獻