這本由李穎著的《細胞抗病毒天然免疫信號轉導
的調控機制》論述的是：宿主細胞對外來病原微生物
的識別和病毒感染誘導I型干擾素表達信號轉導的調
控是細胞抗病毒天然免疫信號轉導這一領域中兩個十
分重要的問題。在該論文的研究工作中，作者通過報
告基因篩選鋻定得到新型核酸受體LSM14A，為細胞抗
病毒天然免疫提供了一種新的病原分子識別機制；通
過Flag親和層析和質譜鋻定，發現ISG56作為I型干擾
素誘導蛋白，負反饋調節病毒感染誘導的I型干擾素
表達，揭示了一種新的抗病毒天然免疫信號轉導負反
饋調節機制，為細胞抗病毒反應的精細調控提供了新
的認識。

第一章 研究背景
第一節 天然免疫對病原微生物的識別
一、天然免疫概述
二、天然免疫的模式識別受體
第二節 抗病毒天然免疫的信號轉導及其調控機制
一、抗病毒天然免疫信號轉導概述
二、I型干擾素基因轉錄調控機制
三、模式識別受體介導的天然免疫信號轉導
四、模式識別受體介導的信號轉導的調控機制
第三節 病毒誘導I型干擾素表達的早、晚期事件和干擾素效應因子
一、病毒誘導I型干擾素基因表達的早、晚期事件
二、干擾素誘導的效應因子
第二章 實驗材料和實驗方法
第一節 實驗材料
一、細胞繫、細胞培養和細胞因子
二、病毒
三、抗體
四、表達載體
五、核酸操作及檢測試劑盒
六、其他試劑
七、耗材
八、特殊儀器和設備
第二節 實驗方法
一、表達載體構建和質粒純化
二、細胞培養和瞬時轉染
三、原代細胞的分離培養和轉染
四、熒光素酶報告基因實驗
五、蛋白復合物的純化和質譜鋻定
六、免疫共沉澱和WesternBlot檢測
七、非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
八、RT—PCR
九、VSV空斑實驗
十、體外結合核酸實驗
十一、通過逆轉錄病毒載體構建穩定表達細胞繫
十二、細胞核質分離和亞細胞器分離
十三、免疫熒光和激光共聚焦顯微鏡觀察
第三章 實驗結果和討論一：新型核酸受體L,SMl4A的鋻定及其功能研究
第一節 研究背景與立項依據概述
第二節 實驗結果
一、基因庫篩選
二、過量表達LSM14A激活ISRE、NF—KB和IFN—B啟動子
三、下調內源性LSM14A表達抑制病毒感染誘導的I型干擾素表達
四、LSM14A參與細胞抗病毒反應
五、LSMl4A參與SeV感染早期I型干擾素的表達
六、人腸癌HCTll6細胞LSMl4A—Flag—Knock—in細胞繫的構建
七、LSM14A定位於細胞質
八、LSM14A結合poly(I：C)和poly(dA：dT)
九、LSM14A與RIG-I、VISA相互作用
十、LSM14A介導I型干擾素表達需要RIG—I的參與
十一、LSM14A、RIG-I、VISA與P—bodies的共定位
第三節 小結和討論
第四章 實驗結果和討論二：ISG56負反饋調節病毒感染誘導I型干擾素表達
第一節 研究背景與立項依據概述
第二節 實驗結果
一、ISG56和ISG54是MITA相互作用蛋白
二、過量表達ISG56抑制病毒誘導的ISRE和IFN—B的激活
三、內源性IS(356的表達下調促進病毒感染誘導的IFN—B激活
四、ISG56負調控細胞抗病毒反應
五、ISG56阻斷MITA-VISA和MITA—TBK1的相互作用
第三節 小結和討論
第五章 研究總結和展望
參考文獻
縮略詞表
致謝