基因沉默技術是研究基因功能的關鍵技術，近年倍受重視。王廷華、張連峰、董堅主編的這本《基因沉默理論與技術（第3版）》總結了各類基因沉默技術，介紹了基本理論與實驗方法。包括反義核酸技術，RNA干擾技術，小RNA技術，基因下調和基因敲出技術。其中大部分技術均為本實驗室實踐總結，有較強的適用性。此外，技術原理、技術操作步驟主要以流程圖展示，使之*一目了然，強化實驗操作經驗和注意事項內容，提高實驗可靠性操作性。本書是目前市場上較為全面，適用性*強，反映RNA干擾現狀、與操作的有用著作。

王廷華、張連峰、董堅主編的《基因沉默理論與 技術（第3版）》是《21世紀生物技術繫列》的一個 分冊。全書繫統地介紹了基因沉默的概念、原理、運 用，以及不同的基因沉默技術的理論與技術細節。對 基因沉默進入深入研究，可幫助人們進一步揭示生物 體基因遺傳表達調控的本質。利用基因沉默在基因治 療中有效抑制有害基因的表達，可達到治療疾病的目 的；在功能基因組方面，通過有選擇地使某些基因沉 默，可以測知這些基因在生物體基因組中的功能。基 因沉默技術具有巨大的潛在應用價值。 本書可供生物醫學專業研究生、本科生及從事基 因沉默研究的科研人員閱讀和實驗時參考。

第一章 基因沉默概論
第一節 基因沉默的概念、發現及分類
第二節 基因沉默的原理及發生
第三節 研究基因沉默的意義
第四節 基因沉默的應用
第五節 展望
第二章 基於化學合成法的siRNA干擾技術
第一節 什麼是
第二節 靶序列確定及化學合成方法
第三節 siRNA轉染細胞的方法及注意事項
第四節 siRNA有效片段篩選意義和方法
第五節 siRNA干擾效率檢測與效果評價
第六節 siRNA在生物醫學中的應用
第七節 問題與展望
第三章 microRNA沉默靶基因及其應用
第一節 microRNA的發現和基本概念
第二節 microRNA的結構與形成
第三節 microRNA與疾病
第四節 microRNA與siRNA的區別
第五節 microRNA的研究手段
第六節 microRNA功能分析確定
第七節 microRNA表達檢測
第八節 microRNA研究展望
第四章 siRNA技術構建G6PD缺陷型A375穩轉細胞株
第一節 G6PD缺陷型A375穩轉細胞株的構建方法
第二節 A375-G6PD穩轉細胞株的功能檢測
第三節 A375-G6PD穩轉細胞株的應用
第五章 基於PENK基因干擾克隆載體構建的RNA干擾技術
第一節 實驗原理與實驗目的
第二節 實驗設備、試劑
第三節 實驗步驟
第六章 α-突觸核蛋白干擾技術
第七章 人類免疫缺陷病毒轉染皮質神經元
第八章 單純皰疹病毒轉染原代皮質神經元和脊髓神經元
第九章 腺病毒轉染原代皮質神經元和脊髓神經元
第十章 基因敲減理論與實驗技術
第一節 基因敲減技術發展簡史
第二節 基因敲減的概念
第三節 基因敲減的原理
第四節 基因敲減的應用前景
第五節 展望
第十一章 基因組編輯技術
第一節 顯微注射技術
第二節 胚胎移植
第三節 轉基因動物制作
第四節 基因打靶介導的敲除和敲入動物的制作
第五節 轉座子技術在基因修飾中的應用
第六節 TALEN技術介導的敲除動物的制作
第七節 CRISPR/Cas技術介導的基因敲除動物的制作
第八節 克隆動物制作
第十二章 調控eIF-5A1的microRNA預測與驗證
第一節 eIF-5A1靶microRNA的生物信息學預測
第二節 eIF-5A1靶microRNA熒光素酶報告實驗驗證
彩圖