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冷泉港蛋白質組學實驗手冊/生物實驗室繫列
該商品所屬分類:自然科學 -> 生物科學
【市場價】
608-881
【優惠價】
380-551
【介質】 book
【ISBN】9787122141217
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內容介紹



  • 出版社:化學工業
  • ISBN:9787122141217
  • 作者:(美)A.J.林克//J.拉巴阨|譯者:曾明//王恆樑...
  • 頁數:194
  • 出版日期:2012-09-01
  • 印刷日期:2012-09-01
  • 包裝:平裝
  • 開本:16開
  • 版次:1
  • 印次:1
  • 字數:292千字
  • 為了迎接蛋白質組學研究時代的到來,Andrew J.Link和Joshua LaBaer教授通過對學生6年多來的蛋白質組學課程的教學實踐,在不斷修改與完善的基礎上,總結出版了本書,包括各種蛋白質制備和分離方法、質譜分析的一般方法、用於蛋白質表達的編碼序列的高通量克隆、蛋白質芯片的制備和使用以及驗證這些數據的分析方法等內容。冷泉港實驗室的《分子克隆實驗指南》曾影響了一代又一代**的分子生物學研究的科學工作者,《冷泉港蛋白質組學實驗手冊》由A.J.林克、J.拉巴阨編著,希望本書也能對**蛋白質組學研究起到一定的推動作用。
  • 《冷泉港蛋白質組學實驗手冊》由A.J.林克、J.拉巴阨編著,為美國 冷泉港實驗室蛋白質組學課程培訓用書,為蛋白質組學工作者案頭必備實 驗手冊。 內容涉及各種蛋白質制備和分離方法、質譜分析的一般方法、用於蛋 白質表達的編碼序列的高通量克隆、蛋白質芯片的制備和使用以及驗證這 些數據的分析方法等內容。書中附有大量的以step-by-step形式展現的操 作程序,針對關鍵性步驟增加說明性文字加以點撥,並有信息框闡述關鍵 的知識點,具有很強的實用性和可操作性。 《冷泉港蛋白質組學實驗手冊》適用於生物、醫學基礎和藥學等專業 研究生、高年級本科生和相關研究人員查閱參考。
  • 簡介
    實驗1 全細胞裂解物的雙向凝膠電泳和MALDI 質譜分析
    操作程序1.1 酵母細胞裂解液的制備
    操作程序1.2 IPG膠條的再水化和等電聚焦
    操作程序1.3 等電聚焦膠條的平衡
    操作程序1.4 第二向--SDS.PAGE
    操作程序1.5 用SYPRO Ruby進行全蛋白染色
    操作程序1.6 用Pro.Q Diamond進行磷酸化蛋白染色
    操作程序1.7 用Pro.Q Emerald進行糖蛋白染色
    操作程序1.8 用考馬斯亮藍進行全蛋白染色
    操作程序1.9 用質譜兼容的銀染進行全蛋白染色
    操作程序1.10 2D膠的圖像分析和蛋白質回收
    操作程序1.11 膠內酶切
    操作程序1.12 MALDI點靶29實驗2用於質譜分析的蛋白質復合物的純化
    操作程序2.1 培養並收集TAP標記的酵母細胞
    操作程序2.2 為純化TAP標記蛋白質復合物制備酵母細胞抽提物
    操作程序2.3 **步親和富集--利用IgG親和色譜從酵母抽提物中捕獲TAP標記的蛋白質復合物
    操作程序2.4 第二步親和富集--TAP.標記的蛋白質復合物的鈣調蛋白親和色譜
    操作程序2.5 與磁珠的結合
    操作程序2.6 蛋白質復合物的親和純化
    實驗3 用MALDI TOF/TOF串聯質譜進行肽的定性和定量分析
    操作程序3.1 實驗描述
    實驗4 蛋白質復合物分析--高靈敏液相色譜與串聯質譜聯用
    操作程序4.1 HPLC柱毛細管的制作
    操作程序4.2 填裝微毛細管FSC柱
    操作程序4.3 微毛細管RP.HPLC與ESI.質譜聯用
    實驗5 用IMAC和質譜分析磷酸化肽
    操作程序5.1 制備IMAC樣品
    操作程序5.2 制備IMAC柱和反相捕獲柱(前柱)
    操作程序5.3 制備IMAC柱
    操作程序5.4 樣品處理
    實驗6 全細胞裂解物的多維蛋白質鋻定技術分析
    操作程序6.1 使用多維蛋白質鋻定技術分析全細胞裂解物
    實驗7 全細胞提取物的定量質譜檢測技術(iTRAQ)
    操作程序7.1 從酵母細胞制備肽
    操作程序7.2 以iTRAQ試劑標記肽
    操作程序7.3 應用反向色譜柱提純肽
    操作程序7.4 多肽等電聚焦95實驗8串聯質譜數據的分析及確認
    操作程序8.1 使用Global Proteome Machine繫統分析LC.MS/MS數據
    操作程序8.2 使用ProteinPilot軟件進行肽段和蛋白質鋻定
    操作程序8.3 對數據庫檢索程序鋻定為能夠匹配肽段序列的MS/MS譜圖進行評價118
    實驗9 開放閱讀框的高通量克隆--構建大量表達結構
    操作程序9.1 利用Gateway LR反應構造表達結構
    操作程序9.2 用Gateway LR反應產物化學轉化感受態細菌
    實驗10 蛋白質微陣列的構建--核酸可編程性蛋白質陣列
    操作程序10.1 用氨基甲硅烷包被載玻片
    操作程序10.2 在96孔板中制備細菌的培養物
    操作程序10.3 從96孔板中分離質粒DNA
    操作程序10.4 DNA的生物素化、沉澱及樣品布陣
    操作程序10.5 NAPPA載玻片上蛋白質的表達
    操作程序10.6 檢測NAPPA載玻片上的蛋白質
    操作程序10.7 在NAPPA芯片上測定DNA151
    實驗11 使用核酸可編程性蛋白質陣列鋻定蛋白質.蛋白質相互作用
    操作程序11.1 NAPPA芯片與查詢蛋白共表達
    操作程序11.2 在NAPPA芯片上檢測查詢蛋白
    附錄1 鈉升電噴霧電離離子源和串聯質譜裝置和示範
    附錄2 溶液內蛋白質的消化
    附錄3 凝膠內胰酶消化已分離蛋白
    附錄4 三氯乙酸蛋白質沉澱法
    附錄5 氨基酸的單同位素和亞銨離子分子量
    附錄6 氨基酸二肽分子量
    附錄7 LTQ離子阱的使用方法
    附錄8 肽段混合物離線去鹽
    附錄9 感受態細胞的制備
    附錄10 DNA的定量
    附錄11 注意事項
    索引
 
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