《細胞生物學層次化實驗指導》由南京大學多年
從事細胞生物學理論與實驗教學的教師薛雅蓉、張晶
、華子春編寫。共收錄55個有代表性的細胞生物學實
驗，依據類型、難度、用時等特點對實驗內容進行了
歸類和編排，分為三章。第一章編寫了22個基本型實
驗，涉及細胞的形態、結構觀察及組成顯示，細胞計
數，細胞生理，細胞分裂，細胞裂解及效果檢測，細
胞器的分離及細胞融合；第二章為21個綜合型實驗，
包括細胞的分離與分選、細胞培養、細胞增殖及細胞
活力檢測、細胞黏附與遷移分析、細胞的激活及信號
轉導分子檢測、哺乳動物細胞轉基因及表達檢測、細
胞周期調控及檢測：第三章為12個開放探索型實驗，
涉及細胞凋亡及脹亡的誘導及檢測、細胞白噬的誘導
及檢測、細胞衰老的誘導與檢測、細胞分化的誘導及
檢測、小干擾RNA引起的基因沉默、細胞端粒酶活性
檢測。此外，還有附錄介紹常用溶液的配制、腹水瘤
小鼠模型的建立和細胞培養前的準備工作，並附書中
部分實驗結果彩圖。
本書適合作為高等院校生命科學類專業本科生的
細胞生物學實驗教材使用。

第一章 基本型實驗
第一節 細胞的形態、結構觀察及組成顯示
實驗1 血細胞裝片及塗片的制備及染色觀察
實驗2 植物細胞的葉綠體、線粒體及液泡觀察
實驗3 蟾蜍胸骨劍突軟骨細胞高爾基體的中性紅染色
實驗4 馬鈴藷和花生徒手切片的制備及細胞內多糖、脂肪的染色
實驗5 孚爾根法顯示細胞中的DNA
實驗6 甲基綠-派洛寧染色法顯示細胞中的DNA和RNA
實驗7 考馬斯亮藍染色法顯示洋蔥鱗莖內表皮及巨噬細胞的細胞骨架
實驗8 酸性磷酸酶法顯示巨噬細胞溶酶體
實驗9 細胞中過氧化物酶體的顯示
實驗10 酶免疫細胞化學法顯示人T細胞表面CD3分子
實驗11 細胞大小的顯微測量
第二節 細胞計數
實驗12 細胞計數
第三節 細胞生理
實驗13 哺乳動物紅細胞膜的通透性檢測
實驗14 植物細胞質壁分離現像觀察及質壁分離法測定基態滲透值
實驗15 小鼠腹腔巨噬細胞吞噬現像觀察及吞噬活性檢測
實驗16 臺盼藍染料排除法檢測活細胞比率
第四節 細胞分裂
實驗17 壓片法制備植物組織細胞分裂標本片及分裂各期細胞特征觀察
實驗18 滴片法制備動物細胞分裂標本片及細胞分裂指數分析
第五節 細胞裂解及效果檢測
實驗19 小鼠腹水瘤細胞裂解及乳酸脫氫酶活性檢測
第六節 細胞器的分離
實驗20 植物細胞葉綠體的分離
實驗21 動物細胞線粒體的分離
第七節 細胞融合
實驗22 PEG介導的細胞融合
參考及拓展閱讀文獻
第二章 綜合型實驗
第一節 細胞的分離與分選
實驗23 密度梯度離心法分離血液單個核細胞
實驗24 免疫磁珠分選法分離小鼠脾髒CD4+T淋巴細胞
實驗25 T細胞的免疫熒光標記及流式細胞儀分選
第二節 細胞培養
實驗26 貼壁細胞的原代培養
實驗27 貼壁細胞的傳代培養
實驗28 細胞凍存與解凍復蘇
實驗29 動物外周血細胞培養及染色體制備
第三節 細胞增殖及細胞活力檢測
實驗30 MTT比色法檢測細胞增殖與活力
實驗31 CCK-8法檢測細胞增殖與活力
第四節 細胞黏附與遷移分析
實驗32 腫瘤細胞黏附能力分析
實驗33 檢測腫瘤細胞侵襲能力的Transwell小室實驗
實驗34 腫瘤細胞遷移的劃痕實驗(wound scratch assay)
第五節 細胞的激活及信號轉導分子檢測
實驗35 利用鈣離子熒光探針檢測細胞內Ca2+濃度
實驗36 信號蛋白磷酸化水平檢測
實驗37 轉錄因子NF-xB活性檢測
第六節 哺乳動物細胞轉基因及表達檢測
實驗38 綠色熒光蛋白基因轉染體外培養的小鼠成纖維細胞及表達檢測
第七節 細胞周期調控及檢測
實驗39 利用流式細胞術分析細胞周期時相
實驗40 細胞周期蛋白D1基因轉染細胞及細胞周期檢測
實驗41 胸腺嘧啶脫氧核苷(TdR)雙阻斷法同步化培養動物細胞
實驗42 秋水仙胺阻抑法分離貼壁培養的哺乳動物M期細胞
實驗43 植物細胞中期同步化誘導
參考及拓展閱讀文獻
第三章 開放探索型實驗
第一節 細胞凋亡及脹亡的誘導及檢測
實驗44 凋亡細胞及脹亡細胞的形態學檢測
實驗45 Annexin V-FITC／PI雙染色法檢測凋亡與脹亡細胞
實驗46 凋亡細胞DNA的電泳檢測
實驗47 TUNEL技術原位檢測凋亡細胞DNA斷裂
第二節 細胞自噬的誘導及檢測
實驗48 MDC染色法檢測巨噬細胞自噬現像
實驗49 GFP-LC3基因轉染法顯示自噬體
第三節 細胞衰老的誘導與檢測
實驗50 細胞ROS的流式細胞儀檢測
實驗5l H2O2誘導細胞衰老及胞內衰老相關的β-半乳糖苷酶檢測
第四節 細胞分化的誘導及檢測
實驗52 骨髓造血干細胞的誘導分化
實驗53 視黃酸誘導腫瘤細胞分化及檢測
第五節 小干擾RNA引起的基因沉默
實驗54 RNA干擾沉默綠色熒光蛋白基因
第六節 細胞端粒酶活性檢測
實驗55 腫瘤細胞的端粒酶活性檢測
參考及拓展閱讀文獻
附錄一 本書常用溶液配制方法
附錄二 腹水瘤小鼠模型建立方法
附錄三 細胞培養前的準備工作